1. 产品描述：

考马斯亮蓝蛋白定量法又称Bradford法，是最常用的蛋白质快速定量方法之一。考马斯亮蓝（Coomassie brilliant blue G-250）与蛋白质结合后染料的最大吸收峰由465 nm变为595 nm，溶液的颜色由棕色变为蓝色，在595 nm波长下测定的吸光度值与蛋白含量成正比。灵敏度比Lowry法高4倍，与BCA法相当。反应迅速，2 min达到平衡并在1 h内保持稳定。操作简便，只需要一种反应试剂。干扰物质少，K⁺、Na⁺、Mg²⁺、Tris、葡萄糖、蔗糖、甘油、巯基乙醇、(NH₄)₂SO₄、乙醇、EDTA等均不干扰此测定法。本试剂盒采用改良考染法和优化的试剂组成以及优化的测定方案，可对5~2000 µg/mL浓度范围的蛋白进行线性检测，显著提高了蛋白检测灵敏度。

2. 产品特点：

（1）简单便捷、灵敏度高；

（2）线性标准曲线范围为5~500和50~2000 µg/mL；

（3）不受大部分金属离子或螯合剂影响。

1. 产品组分：

2. 储运条件：

考马斯亮蓝溶液置于2~8℃保存，有效期12个月，2~8℃运输；

配套的BSA 蛋白标准品(5000 μg/mL)，置于-25~-15℃保存，有效期12个月，2~8℃运输。

3. 注意事项：

（1）分别在595 nm和450 nm测定OD值，计算OD594/OD450，以此代替原有的OD595作图，可明显提高检测的精确度和灵敏度约10倍，显著提高测定的线性关系，并降低去垢剂的影响。在进行超敏感度测定时可考虑此法；

（2）主要干扰物质的终浓度：SDS<0.002%；Triton X-100<0.1%；Tween-20/60/80<0.015%；NaOH<0.1 N；

（3）蛋白-染料结合物在1 h内保持稳定，但在5~20 min内稳定性最好，因此应尽快测定。如果放置过久将出现沉淀，或使测定结果偏低；

（4）染料不结合精氨酸、赖氨酸及分子量小于3 kDa的短肽，所以不同的蛋白质由于精氨酸和赖氨酸含量不同会出现小范围的测量偏差；小于3 kDa的短肽纯品不能用此方法测定；

（5）蛋白-染料结合物附着在石英比色皿后难以洗去，因此不宜使用石英比色皿。可用玻璃或塑料比色皿，用后立即用95%乙醇或洗涤剂浸泡洗涤。塑料比色皿不可用乙醇长时间浸泡；

（6）标准曲线应该每次新做。但每一稀释度的BSA标准品可预先配好-20℃冻存备用，注意在使用这种非新鲜配制的BSA时，如果发现标准曲线的某一些点偏差较大，说明稀释的BSA已经坏掉应予重配。