信励致和^®免染一步法 PAGE 凝胶快速配制试剂盒（系列）采用预混配方的胶溶液与缓冲溶液，将其两两混合，再加入促凝剂即可凝胶。灌入下层胶后，无需液封，可直接灌入上层胶，简便快捷。本产品适用于 Tris - Gly 电泳体系，所制备的凝胶为免染 PAGE 胶，蛋白条带经紫外曝光即可成像，无需染胶。配套提供的改良型促凝剂，具有良好的稳定性和促凝效果，配胶过程中无需添加 TEMED。本试剂盒可配制 125 块mini PAGE 胶(以 0.75 mm 厚度胶计算)，灌制的凝胶可用于变性或非变性 PAGE 凝胶电泳。

（1）紫外成像：无需染胶，蛋白条带可直接紫外曝光成像。

（2）快速制备凝胶：短时间即可灌制多块凝胶，无需计算所需溶液量，无需稀释。

（3）一步法制胶：灌入下层胶后，无需液封，可直接灌入上层胶，简便快捷。

（4）点样方便：可制备彩色上层胶，为点样提供便利。

（5）避免异味：无需使用 TEMED，避免恶臭气味。

（6）条带清晰：尤其小分子蛋白质条带比在传统凝胶中更清晰。

免染一步法PAGE凝胶快速配制试剂盒2 ~ 8℃保存，有效期18个月，2 ~ 8℃运输。

改良型促凝剂，-25 ~ -15℃保存，有效期18个月，可在2 ~ 8℃保存至少6个月，2 ~ 8℃运输。

（1）改良型促凝剂的使用量仅作参考，实际用量可根据个人实验习惯和经验调整。凝胶的凝聚速度与温度和改良型促凝剂用量呈正相关性，温度越高、改良型促凝剂用量越大则凝胶的凝聚速度越快。凝胶聚合过快不利于操作且有产生气泡的可能，因此不同的室温环境下，可通过改变改良型促凝剂的用量，适当调整凝胶的聚合速度。

（2）在配胶前，请将本试剂盒从冰箱拿出并放置恢复至室温，可有效减少因液体中溶解的气体不能及时排出而造成凝胶中气泡的产生。改良型促凝剂恢复室温才可溶解彻底，频繁使用可放置 2 ~ 8℃保存或分装保存。

（3）本产品制备出的凝胶其上层胶对样品没有浓缩效应，与预制胶类似，但与传统 PAGE 胶相比，对蛋白条带分离效果更好，小分子量蛋白(比如 10 kDa)也可以清晰地分离开，且蛋白条带更窄更锐利。

（4）电泳条件可根据实验需求自行调整，推荐电泳条件：150 V，约 60 min（或 200 V，约 45 min）。

（5）因染料本身性质，彩色上层胶缓冲液长期静置后会产生沉淀，使用前请轻柔混匀。

（6）本产品凝胶速度快，无需将凝胶模具放在 37℃温箱或者空调热风口下，正常室温条件下配制即可。

（7）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

（8）本产品仅供科学研究使用，不得用于临床医学诊断及其余非合理用途。

1.不同下层胶浓度的分离效果示意图:

以上为Tris-Gly缓冲系统中，不同分子量大小蛋白条带在不同浓度凝胶中的分离效果示意图。

2.不同下层胶浓度的分离效果实拍图:

以上为Tris-Gly缓冲系统中，信励致和®预染色蛋白Marker 10 kDa~250 kDa (SKU：AC0551)在不同浓度凝胶中的分离效果实拍图，凝胶拍摄时处在玻璃板中间。

实际分离情况受温度、pH值影响，本图仅供参考。

3.凝胶电泳后效果实拍图：

图为大肠杆菌样本总蛋白经本品（12%下层胶浓度）进行PAGE凝胶电泳的效果，分别使用紫外凝胶成像仪和手机进行拍摄。

1. 如何减少电泳过程中的条带异常？

调整电泳条件，对于新配制的电泳缓冲液和正确装配的电泳槽，应定期更换缓冲液以避免杂质积累，并确保电泳槽的正确装配和电极接触良好。

2. 如何避免胶孔漏样？

应避免过大的加样量及温和的操作，防止损坏孔道。

 3. 如何避免上、下层胶分界面不平？

上、下层胶分界面不平，可能是因为下层胶凝固较快，灌上层胶时将其冲变形且无法恢复所致。可通过降低下层胶促凝剂的使用量、缓慢轻柔灌上层胶来改善。

 4. 紫外照射下蛋白条带的可见度弱？

紫外激发荧光基团需一定时间，一般经 1 ~ 5 min，凝胶上即可呈现清晰的蛋白条带。本品适宜的荧光激发波长在302 nm左右（280 nm ~ 315 nm），使用前请检查紫外灯设备是否符合要求。

 5. WB转膜后看不见条带？

观察Wester Blot转印后膜上蛋白条带，必须在电泳后，将凝胶经紫外激发出现清晰条带后，再进行转膜操作。若直接转膜再用紫外激发，荧光信号会很弱或无信号。