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信励致和®专注复杂体系内的蛋白质检测与分析的问题,提供免疫印记、酶联免疫、免疫组化等常见免疫研究方法所需的产品和服务,帮助研究者快速搞定蛋白质实验,获得理想实验结果。
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CCK-8细胞活力检测试剂盒
规格
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用途
用于细胞增殖测试、细胞毒性测试和药物筛选等实验。
产品介绍
信励致和®CCK-8细胞活力检测试剂盒,是一种基于WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)的显色反应,广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度、无放射性的比色检测试剂盒。WST-8在电子耦合载体1-Methoxy PMS的作用下可被线粒体内的脱氢酶还原成高度水溶性的橙黄色甲臜产物(formazan),生成的甲臜量与活细胞数成正比,与细胞毒性成反比,使用酶标仪在450 nm波长处测得吸光值,间接反映活细胞数量。本试剂盒的CCK-8溶液为即用型试剂,可直接加入到细胞样品中,孵育一定时间后即可检测,不需要预配各种成分。
(1)操作简便:即开即用,无需配制其他试剂。
(2)灵敏度高:灵敏度、线性相关性高,重复性好。
(3)细胞毒性低:对细胞毒性低,不影响后续实验。
使用说明
1.产品组分:
2 ~ 8℃避光保存 12 个月,2 ~ 8℃运输。
(1)本试剂为粉红色液体,使用时需避光操作。
(2)首次实验时,建议先摸索最佳的细胞接种数目以及最佳的CCK-8溶液的孵育时间(常规孵育时间为1 ~ 4 h)。
(3)实验操作中避免产生气泡。
(4)本试剂盒的检测是依赖于脱氢酶催化的反应,还原性物质以及氧化性物质均会干扰检测,使用前应先去除干扰物质再加CCK-8溶液进行检测。
(5)进行药物抑制实验时,如果药物中含有金属离子(Pb2+、Fe2+、Cu2+等)会影响 CCK-8溶液的显色反应,最终导致检测的灵敏度降低。
(6)测定细胞数量时,为保证单次实验结果的稳定性和重复性,建议每次同时做标准曲线。
相关数据
检测HEK293T细胞的标准曲线:
使用本品和竞品分别以细胞数量对吸光值绘制标准曲线(以HEK293T细胞为样本于96孔板中铺片,单组三个复孔设11个细胞数梯度,每组细胞数分别为:0、1000、2000、4000、8000、12000、24000、30000、35000、40000、48000/孔)。与竞品相比,本品相关性优于竞品,表明使用本品检测具有高准确性。
常见问题
原因分析:细胞数量过多或过少;孵育时间过长或过短;细胞活性低。
解决方案:减少或增加细胞数量,建议实验前设定几个不同细胞数量的孔进行条件摸索;缩短或延长孵育时间,增加细胞数量或延长孵育时间。
原因分析:孔中有气泡;培养板的边际效应;试剂未混匀。
解决方案:刺破或使用吹风机轻吹以消除气泡;孔板最外侧孔中只加培养基,不用作实验孔;更换新鲜的培养基并加入本试剂,轻弹使充分混匀。
CCK-8细胞活力检测试剂盒说明书
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胰酶溶液(0.25%)[(-)EDTA,酚红]
用于培养细胞或部分组织内细胞之间的消化。
SKU:CINO 1033; CINO 1067
胰酶溶液(0.25%)[(+)EDTA,酚红]
SKU:CINO 1064; CINO 1027
胰酶溶液(0.25%)[(+)EDTA][(-)酚红]
SKU:CINO 1029; CINO 1065
胰酶溶液(0.25%)[(+)酚红][(-)EDTA]
SKU:CINO 1066; CINO 1031